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应用分享 | 牛奶中氢化可的松的检测
作者:华谱生物   时间:2023-02-10

氢化可的松,又称皮质醇,是从肾上腺皮质中提取出的是对糖类代谢具有最强作用的肾上腺皮质激素,即属于糖皮质激素的一种。

本次应用参考农业部1031号公告-2-2008 动物源性食品中糖皮质激素类药物多残留检测 液相色谱-串联质谱法,使用HPSW Silica相萃取柱进行测定。Silica为未键合的活性硅胶正相吸附剂,呈弱酸性,具有很强的极性,对目标物的保留主要是通过氢键作用力。硅胶表面硅羟基可以电离,在中等pH条件下,功能类似于弱阳离子交换吸附剂的作用。

一、标液配置

氢化可的松标准使用液(10μg/mL),临用前用流动相配置。

二、样品提取

纯牛奶:称取5g样品到50ml具塞离心管中,加10ml乙腈,涡旋,加2g氯化钠,涡旋,振摇使充分混匀,5000/分离心5分钟,取上清液置氮吹管中,25ml容量瓶中,45氮吹至干1ml乙酸乙酯涡旋,再加5ml正己烷,涡旋混匀作待净化液。

HPSW Silica 硅胶基质固相萃取柱

三、净化

HPSW Silica500mg/6ml

1)活化:5 mL正己烷;

(2)上样淋洗:取全部待净化液过柱,弃去流出液。用5ml正己烷洗涤。弃去流出液;

(3)洗脱:用6ml丙酮-正己烷(2+3)洗脱,收集洗脱液与氮吹管中,45℃氮吹至干。加1ml乙腈-水(2+8),涡旋,过0.22μm有机滤膜,上机。

四、参考仪器条件

仪器:Waters UPLC

色谱柱:Morphling WD-C18(4.6mm×250mm,5μm)

检测器:PDA

检测波长:243nm

流速:1.0ml/min 进样体积:10μL 柱温:常温

洗脱条件:

五、实验结果

加标水平浓度:2mg/kg10μg/mL

图1:标准溶液图


图2:样品

图3:加标图

六、产品订购信息


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