磺胺(对氨基苯磺酰胺)类药物为人工合成的抗菌药,用于临床已近50年,它具有抗菌谱较广、性质稳定、使用简便等优点。服用可产生明显的肾毒性,本类药物可致肝脏损害,可引起黄疸、肝功能减退,严重者可发生肝坏死。人类长期接触,会引起干咳、食欲不振、口中有恶臭味、头痛、头晕、易疲乏、精神萎靡等。
本次应用参考GB 29694-2013 食品安全国家标准 动物性食品中13种磺胺类药物多残留的测定 高效液相色谱法,使用HPSW MCX固相萃取柱进行测定,该产品具有良好的水可浸润性和化学稳定性,对碱性化合物有很好的保留。
磺胺甲基嘧啶,磺胺二甲基嘧啶,磺胺间甲氧嘧啶,磺胺甲恶唑,磺胺氯哒嗪准使用液(50μg/mL),临用前用乙腈配置。猪肉:取本品约5g,精密称定,置具塞离心管中,精密加入乙酸乙酯20ml,涡旋2分钟,振荡提取10分钟,离心,5000转/分离心5分钟,取上清液于60ml氮吹管中,残渣加20ml乙酸乙酯重复提取一次,合并两次提取液,45℃氮吹至近干。加入3ml水,3ml正己烷,涡旋1分钟,转移至10ml离心管中,3000转/分离心1分钟。弃正己烷,下层液备用。HPSW MCX 聚合物基质固相萃取柱
HPSW MCX(60mg/3ml)
(1)活化:5ml甲醇,5ml水;
(2)上样淋洗:取备用液过柱,依次加入5ml水,5ml甲醇,弃去流出液。吹干小柱;
(3)洗脱:分两次每次2ml氨水甲醇(5+95)洗脱小柱,收集洗脱液,45℃氮吹至干。加1ml乙腈-0.1%甲酸水(2+8),涡旋,过0.22μm有机滤膜,上机。
仪器:Waters UPLC
色谱柱:Morphling WD-C18(4.6mm×250mm,5μm)
检测器:PDA
检测波长:270nm
流速:1.0ml/min 进样体积:10μL 柱温:35℃
洗脱条件:
加标水平浓度:2mg/kg(10μg/mL)
肉类如果不是现制备现处理测定的话,用有机溶剂提取会出现成块导致无法有效充分提取,本实验可以称样5g后加入5ml水,振摇使样品分散后再加入提取液乙酸乙酯,且不会影响实验结果。淋洗液水可用2%甲酸水溶液代替,不会影响实验结果。